人促黑激素(MSH)酶聯(lián)免疫分析
試劑盒使用說明書
ELISA檢測試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍: 96T
5pg/ml-200pg/ml
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促黑激素(MSH)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人促黑激素(MSH)水平。用純化的人促黑激素(MSH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黑激素(MSH),再與HRP標記的促黑激素(MSH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的促黑激素(MSH)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人促黑激素(MSH)濃度。
試劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品(320pg/ml) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標本要求
1.ELISA檢測試劑盒標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
160pg/ml | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
80pg/ml | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
40pg/ml | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
20pg/ml | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
10pg/ml | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
操作程序總結(jié):
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
6.ELISA檢測試劑盒底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
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