ELISA試劑盒在的實踐運用中,通過不同的規(guī)劃,詳細的方法步驟可有多種。如雙抗體夾心法、間接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法測IgM抗體、運用親和素和生物素的ELISA。在今天的技術內容中,上海通蔚生物公司為您詳解ELISA方法規(guī)劃的原理依據(jù)。
ELISA試劑盒以免疫學反應為根底,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗刷除去剩余的游離反應物,從而確保試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。
運用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP符號的抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,通過*洗刷后加底物TMB顯色。
ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線核算樣品的濃度。
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