在ELISA實(shí)驗(yàn)中,洗板是十分重要的進(jìn)程。酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)(elisa)洗刷進(jìn)程雖不是一個(gè)反響進(jìn)程,但卻也決議著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELISA便是通過洗刷來抵達(dá)分別游離和結(jié)合的酶符號物的意圖,通過洗刷以鏟除殘留在微孔板中未能與固相抗原或抗體相結(jié)合的物質(zhì),以及在反響進(jìn)程中的非特異性吸附于固相載體上的煩擾物質(zhì)。聚苯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附是廣泛的,在ELISA測定的反響進(jìn)程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附,洗刷時(shí)又應(yīng)將這些非特異性吸附的煩擾物質(zhì)洗刷掉。在ELISA試劑盒操作中,洗刷是十分要害的,應(yīng)引起操作者的高度重視。
洗板辦法分為兩種,今日為我們做出詳細(xì)介紹:
1. 手藝洗板辦法:按試劑說明書嚴(yán)峻操作,稀釋液用蒸餾水按1∶20稀釋濃縮洗液,適量置于臉盆之中。從37 ℃水浴溫箱中拿出溫浴到時(shí)的反響板,到洗刷池處,鋪開自來水約1 min,然后快速甩掉反響液,即用自來水沖刷數(shù)次,甩掉水并用潔凈的毛巾吸干,放入配好洗刷液的臉盆之中,浸泡5 min~10 min,然后將反響板取出,甩掉洗刷液,再用自來水沖刷數(shù)次,用潔凈吸水的毛巾拍干(屢次)反響板。加顯色劑a、b后,振動(dòng)封板,放入37 ℃水浴溫箱10 min,取出,加間斷液,振動(dòng),上酶標(biāo)儀讀板,查詢作用。按感染性醫(yī)療廢物處理洗刷池的液體及用過的洗刷液:參加健之素(500 mg/片),使其濃度抵達(dá)2 500 mg/l,浸泡24 h,搜集起來,交醫(yī)療廢物處理公司處理。 1.2.2 洗板機(jī)法 按試劑說明書嚴(yán)峻操作,稀釋液用蒸餾水按1∶20稀釋濃縮洗液,ELISA試劑盒適量置于洗板機(jī)洗液瓶里。將反響到時(shí)的反響板取出,用洗板機(jī)洗板5次,每次浸泡1 min,取出,用潔凈的毛巾拍干(屢次)反響板。加顯色劑a、b后,振動(dòng)封板,放入37 ℃水浴溫箱10 min,取出,加間斷液,振動(dòng),上酶標(biāo)儀讀板,查詢作用。
2. 主動(dòng)洗板:按試劑說明書嚴(yán)峻操作,稀釋液用蒸餾水按1∶20稀釋濃縮洗液,適量置于洗板機(jī)洗液瓶里。將反響到時(shí)的反響板取出,用洗板機(jī)洗板5次,每次浸泡1 min,取出,用潔凈的毛巾拍干(屢次)反響板。加顯色劑a、b后,振動(dòng)封板,放入37 ℃水浴溫箱10 min,取出,加間斷液,振動(dòng),上酶標(biāo)儀讀板,查詢作用。
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