細胞是非常脆弱的,一不小心就會出現(xiàn)變數(shù),提高細胞成活率提高實驗成功率,要選擇一款的血清。
血清是細胞培養(yǎng)的天然培養(yǎng)基,血清選錯了,細胞自然狀態(tài)會受影響。
胎牛血清具有極為重要的作用,其包括:
1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調(diào)變它們所結合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
細胞與溶解方法其實并不難:
1. 擦拭瓶外壁和蓋子,等其晾干。
2. 稱量整個瓶子(等到天平讀數(shù)穩(wěn)定),記錄數(shù)據(jù),至0.1mg。
3. 用合適的溶劑(能溶解產(chǎn)品并容易揮發(fā))將瓶內(nèi)的產(chǎn)品轉移到容量瓶中。蕩洗瓶蓋和瓶內(nèi)壁數(shù)次并都轉移到此容量瓶中。
4. 中等加熱或者氮吹使瓶外壁和內(nèi)壁干燥。
5. 在同一臺天平上稱量空瓶連蓋的重量,至0.1mg。
6. 兩次稱量差值即為容量瓶內(nèi)溶解的產(chǎn)品量。
7. 用溶劑定容至容量瓶刻度,即可計算所配溶液的濃度。
胎牛血清是品質(zhì)的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分zui少。?
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