研究人員提出,應(yīng)留意以下原理:因為蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用,這種物理吸附長短特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。包被液的選擇,一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液。ELISA試劑盒但有時因為試驗的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。詳細(xì)的試驗還要有堅固的理論外也要實踐,看一下*可不可以應(yīng)用到自己試驗當(dāng)中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液,還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。ELISA試劑盒端??赏ㄟ^控制基因表達(dá)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的行為,但具體機(jī)制仍不清楚。Seimiya認(rèn)為,這項研究有望帶來新型的癌癥療法基因表達(dá)譜分析表明,腫瘤形成伴隨著先天免疫系統(tǒng)相關(guān)基因的表達(dá),這些基因與維持腫瘤細(xì)胞的未分化狀態(tài)和癌癥預(yù)后較差相關(guān)。在端粒延伸細(xì)胞所產(chǎn)生的腫瘤中,這些基因表達(dá)的上調(diào)未被觀察到。
根據(jù)這些結(jié)果,但*選用什么,要依據(jù)試驗詳細(xì)來實踐。常用封鎖劑有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明膠;脫脂奶粉,比較價廉,可以高濃度使用(5%-10%);還有一些稀有用到的各種動物血清(主要為了排除相似蛋白干擾)和酪蛋白等等。封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,從而排斥ELISA試劑盒后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。封鎖:繼包被之后用高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。
但*選用什么,要依據(jù)試驗詳細(xì)來實踐。常用封鎖劑有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明膠;脫脂奶粉,比較價廉,可以高濃度使用(5%-10%);ELISA試劑盒還有一些稀有用到的各種動物血清(主要為了排除相似蛋白干擾)和酪蛋白等等。封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,從而排斥ELISA試劑盒后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。封鎖:繼包被之后用高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。
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