更新時(shí)間:2023/7/3
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降鈣基因相關(guān)肽放免藥盒操作說(shuō)明書 CGRP(HY-041) RIA KIT 降鈣素基因相關(guān)肽(Calcitonin gene related peptide CGRP)是近年來(lái)在人和哺乳動(dòng)物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的一種生物活性物質(zhì)。CGRP廣泛分布于中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)以及某些器官組織中,它是目前已知zui強(qiáng)的舒血管物質(zhì)。對(duì)各系統(tǒng)特別是心血管系統(tǒng)有著重要的調(diào)節(jié)作用。 CGRP在機(jī)體病理?xiàng)l件下的防御和代償意義已受到高度重視。一般認(rèn)為在正常生理狀態(tài)下,血漿CGRP和內(nèi)皮素(ET)濃度保持相對(duì)恒定。因此,測(cè)定血漿CGRP對(duì)于研究心肌缺血、腦卒中、高血壓、體外循環(huán)、血管再通以及組織移植都具有廣闊的臨床前景。 藥盒組成:(常溫運(yùn)輸,4℃保存) 1、 緩沖液(PBS)1瓶,用時(shí)每瓶加蒸餾水至50ml 2、PR分離劑(第二抗體)1瓶:用前充分搖勻 3、CGRP抗體1瓶。 4、125I- CGRP 1瓶: 5、CGRP標(biāo)準(zhǔn)品6瓶,濃度為20、60、150、300、600、1200pg/ml。 樣品收集: 1、血漿采集: 取靜脈血3ml ,注入含10%EDTA.Na2 30ul和抑肽酶10ul(含100U/ml以上)的試管中混勻,4℃3000rpm/ min離心10min分離血漿,-20℃保存2個(gè)月,-70℃以下保存 半年。測(cè)定前,使樣本置于室溫或冷水中復(fù)融,混勻后,再次4℃3000rpm/ min離心5min,取上清測(cè)定。 2、組織樣品的處理: 取出活組織,吸去血跡,稱重,盡快放入1N HAC 1ml略做碾磨,然后在100℃水中煮沸10min,勻漿。4℃3000rpm/ min離心15min,取上清-20℃以下保存,測(cè)定時(shí)用PBS五倍以上稀釋,以調(diào)節(jié)PH值。每種組織的樣品非特異結(jié)合(U0)可能有差異,每份標(biāo)本單獨(dú)做一個(gè)U0。取組織的重量一般在100mg左右為好。 測(cè)定方法:(非平衡法加樣) CGRP RIA加液程序 (單位: ul ) ———————————————————————————— 試 劑 T NSB S0 S1~S6 樣 品 ———————————————————————————— 緩 沖 液 —— 300 200 —— —— 標(biāo) 準(zhǔn) 品 —— —— —— 200 —— 樣 品 —— —— —— —— 200 抗 體 —— —— 100 100 100 ———————————————————————————— 搖勻4℃ 放24小時(shí) ———————————————————————————— 125I- CGRP 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 搖勻4℃ 放24小時(shí) ———————————————————————————— 分 離 劑 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混勻,室溫15分鐘, 3500 轉(zhuǎn)/分 4℃離心20分鐘,吸棄上清液,測(cè)定沉淀cpm數(shù)。 注:測(cè)定兔標(biāo)本時(shí),應(yīng)改用功25% PEG 作分離劑,每管加500ul,NSB、S0、S1~S6管補(bǔ)加正 常人血清100ul/管(或r-球蛋白100 ul/管);U、U0管加PBS 100ul/管。 結(jié)果計(jì)算: 以N/T、B/T計(jì)算NSB、S0結(jié)合百分率,以B/B0計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)及待測(cè)樣品結(jié)合百分率,在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并查出樣品值, 或由自動(dòng)r計(jì)數(shù)儀預(yù)先編制程序。直接給出有關(guān)參數(shù),標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品濃度。 注意事項(xiàng): 本月標(biāo)準(zhǔn)品每瓶用 ml緩沖液稀釋 本月藥盒抗體每瓶用 ml緩沖液稀釋 本月藥盒標(biāo)記每瓶用 ml緩沖液稀釋 本月分離劑在使用前充分混勻(不可冰凍) 本試劑盒主要技術(shù)指標(biāo): 1. NSB:5%。 2. 靈敏度:<15pg/ml。 3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍:20~1200pg/ml。 4. 批內(nèi)變異系數(shù):CVw<7.0 %。 5. 批間變異系數(shù):CVw < 12.0% 。 6. 特異性:本抗血清與內(nèi)皮素(ET)、胃動(dòng)素(MTL)、骨鈣素(BGP)、C端甲狀旁腺素(C-PTH)、降鈣素(CT)等多肽均無(wú)交叉反應(yīng)。 7. 正常參考值:各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自己的條件建立自己的正常對(duì)照組。 50.6±24.5pg/ml(n=25)。 本次藥盒參考數(shù)據(jù): —————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 —————————————————————————————— CPM —————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————— 生產(chǎn)日期: 有效日期: |
FR-*-034 | AⅡ | 200 | 25-800 | 過(guò)夜 |
血管緊張素Ⅱ | (pg/ml) | |||
FR-*-035 | Aldosterone | 100 | 0.0625-2 | 過(guò)夜 |
醛固酮 | (ng/ml) | |||
FR-*-036 | ANP | 100 | 0.0625-2 | 過(guò)夜 |
心鈉素 | (ng/ml) | |||
FR-*-037 | β2-MG | 50 | 0.2-10 | 37℃ |
β2-微球蛋白 | (ug/ml) | 1h | ||
(寬范圍) | ||||
FR-*-038 | α1-MG | 100 | 2-80 | 37℃ |
α1-微球蛋白 | (ug/ml) | 1h | ||
FR-*-039 | TXB2 | 200 | 12.5-400 | 過(guò)夜 |
血栓素B2 | (pg/ml) | |||
FR-*-040 | 6-Keto-PGFla | 200 | 25-1600 | 過(guò)夜 |
6-酮 | (pg/ml) | |||
FR-*-041 | ET | 200 | 20-1000 | 過(guò)夜 |
內(nèi)皮素 | (pg/ml) | |||
FR-*-042 | CGRP | 200 | 15-1200 | 過(guò)夜 |
降鈣素基因相關(guān)肽 | (pg/ml) | |||
FR-*-043 | ACTh | 100 | 5-405 | 過(guò)夜 |
促腎上腺皮質(zhì)激素 | (pg/ml) |
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